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超氧陰離子測試盒可見分光光度法

簡要描述:超氧陰離子測試盒可見分光光度法公司正在出售的產(chǎn)品:革蘭氏陰性菌增菌液 英文名稱:Gram Negative Bacteria Enrichment Broth 產(chǎn)品規(guī)格:250g 大腸桿菌噬菌體MS2液體培養(yǎng)基 英文名稱:Coliphage MS2 Liquid Medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g 大腸桿菌噬菌體MS2半固體培養(yǎng)基 英文名稱:Coliphage MS2 Medium(Semisoli

  • 產(chǎn)品型號:
  • 廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
  • 更新時間:2023-12-28
  • 訪  問  量:526

詳細(xì)介紹

特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。

產(chǎn)品名稱:超氧陰離子測試盒可見分光光度法

產(chǎn)品規(guī)格:50管/48樣

檢測方法:可見分光光度法

產(chǎn)品貨號:BK-01S6432

產(chǎn)品分類:氧化與抗氧化系列
商品介紹:

測定意義:

生物體內(nèi)超氧陰離子等活性氧具有免疫和信號傳導(dǎo)的作用,但積累過多時會對細(xì)胞膜及生物大分子產(chǎn)生破壞作用,導(dǎo)致機(jī)體細(xì)胞和組織代謝異常,從而引起多種疾病。

測定原理:

超氧陰離子與鹽酸羥胺反應(yīng)生成NO2-,NO2-在對氨基苯磺酸和α-萘胺的作用下,生成紅色的偶氮化合物,在530nm處有特征吸收峰,根據(jù)A530值可以計算樣品中O2-含量。

自備實驗用品及儀器:

天平、水浴鍋、離心機(jī)、可見分光光度計/酶標(biāo)儀、1 mL玻璃比色皿/96孔板、氯仿和蒸餾水。

所需的儀器和用品:

可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水

四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:

建議正式實驗前選取 2 個樣本做預(yù)測定,了解本批樣品情況,熟悉實驗流程,避免實驗

樣本和試劑浪費!

1、樣本制備

組織樣本:

取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進(jìn)行

勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。

【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)15~10 的比例進(jìn)行提取

 

細(xì)菌/細(xì)胞樣本:

先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL

提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);

12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。

【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10

4):提取液(mL)為 500~10001 的比例進(jìn)行提取。 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。

QQ截圖20220307153537.png 

實驗方法學(xué):

一、肝素的配制:

市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動,每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

二、血液樣本的收集:

全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。

2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。

選擇抗凝的注意點:

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后

用于測定。

10次 百萬堿基級動物DNAout  

2 ug pECFP-MEM pECFP-MEM 低溫運輸,-20℃保存

改良鹽緩沖液PSB Phosphate Saline Buffer,Modified 250g

100g 可溶性淀粉 Starch Soluble 室溫干燥保存

50T 玉米BT11/MS PCR檢測試劑盒  低溫運輸,-20℃保存

100mL Percoll 2.0  

125mL HEPES Lysis Buffer with Triton,2X HEPES Lysis Buffer with Triton,2X 常溫保存

0.3mL 可逆型Taq DNA聚合抑制劑 Taq DNA Polymerase Inhibitor -20℃保存

2 ug pLNCX2 pLNCX2 低溫運輸,-20℃保存

Slanetz和Bartley培養(yǎng)基 Slanetz And Bartley Medium 250g

1瓶 NAMALWA細(xì)胞株 NAMALWA 低溫運輸和保存

超氧陰離子測試盒可見分光光度法Phospho-Mst1(Thr183)  磷酸化蛋白激MST1抗體 規(guī)格: 0.1ml

PLEKHM1  石骨癥相關(guān)蛋白PLEKHM1抗體 規(guī)格: 0.2ml

Annexin A1  膜粘連蛋白A1抗體 規(guī)格: 0.1ml

mTOR/FRAP  雷帕霉素靶蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml

C12ORF54  12號染色體開放閱讀框54抗體 規(guī)格: 0.2ml

ZNF217  鋅指脂蛋白217抗體 規(guī)格: 0.2ml

phospho-PIK3C3(Ser282)  磷酸化磷脂酰肌醇激3催化亞單位3抗體 規(guī)格: 0.1ml

phospho-ITGB3(Tyr785)  磷酸化整合素β3抗體 規(guī)格: 0.1ml

CANX/Calnexin  鈣連蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml

Rabbit Anti-dog IgG/Gold  膠體金標(biāo)記的兔抗狗IgG 規(guī)格: 0.5ml

BIRC5/Survivin variant  細(xì)胞凋亡抑制因子5抗體 規(guī)格: 0.2ml

C5orf35  5號染色體開放閱讀框35抗體 規(guī)格: 0.2ml 

注意事項:

1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時在冰上放置。

2、對照管只需要做一管。

3、若對照管吸光值大于2,建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用(10μl試劑二原液+60μl蒸餾水)。

4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管,對照管數(shù)值在什么范圍?

對照管的范圍是0.8-2。對照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;(2)沒有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時間不夠,可以延長反應(yīng)時間(反應(yīng)時間30min可以延長到40min)。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。

若出現(xiàn)測定管大于對照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測,通??梢允箿y定正常。計算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。

 


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