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半胱氨酰亞砜裂解酶(CSL)測試盒微量法

簡要描述:半胱氨酰亞砜裂解酶(CSL)測試盒微量法公司正在出售的產(chǎn)品:DNA甲基綠瓊脂基礎(chǔ) 英文名稱:Dnase Agar Base with Methyl Green 產(chǎn)品規(guī)格:100 布氏瓊脂 英文名稱:Brucella Agar 產(chǎn)品規(guī)格:250g 馬尿酸鈉培養(yǎng)基 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:250g CCDA基礎(chǔ) 英文名稱:CCDA Base 產(chǎn)品規(guī)格:250g

  • 產(chǎn)品型號:
  • 廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
  • 更新時間:2023-12-27
  • 訪  問  量:813

詳細(xì)介紹

實驗方法學(xué):

一、肝素的配制:

市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動,每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

二、血液樣本的收集:

全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。

2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。

選擇抗凝的注意點(diǎn):

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后

用于測定。

特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。

產(chǎn)品名稱:半胱氨酰亞砜裂解酶(CSL)測試盒微量法

產(chǎn)品規(guī)格:100管/48樣

檢測方法:微量法

產(chǎn)品貨號:BK-01S6528

產(chǎn)品分類:氨基酸代謝系列
商品介紹:

測定意義:

半胱氨酰亞砜裂解酶(CSL)廣泛存在于百合科蔥屬(如大蒜和洋蔥),十字花科蕓薹屬

(如卷心菜,菜花,西蘭花),以及豆科中的合金歡屬中,并通常被稱為蒜酶(Alliinase)。香菇酸在γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶和半胱亞砜裂解酶的作用下轉(zhuǎn)化成香菇精,以及產(chǎn)生丙酮酸、乙醛、甲醛和NH3CSL是內(nèi)源性甲醛生成的關(guān)鍵酶之一,測定CSL活性對于研究食品安全具有重要意義。

測定原理

CSL催化S-甲基-L-半胱亞砜反應(yīng)產(chǎn)生丙酮酸,與2,肼反應(yīng),在堿性條件下顯棕紅色,在510nm下有特征吸收峰。

自備實驗用品及儀器

天平、研缽、離心機(jī)、分光光度計、1mL玻璃比色皿、恒溫水浴鍋、蒸餾水。

所需的儀器和用品:

可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水

四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:

建議正式實驗前選取 2 個樣本做預(yù)測定,了解本批樣品情況,熟悉實驗流程,避免實驗

樣本和試劑浪費(fèi)!

1、樣本制備

組織樣本:

取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進(jìn)行

勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。

【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)15~10 的比例進(jìn)行提取

 

細(xì)菌/細(xì)胞樣本:

先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL

提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);

12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。

【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10

4):提取液(mL)為 500~10001 的比例進(jìn)行提取。 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。

QQ截圖20220307153537.png 

注意事項:

1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時在冰上放置。

2、對照管只需要做一管。

3、若對照管吸光值大于2,建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用(10μl試劑二原液+60μl蒸餾水)。

4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管,對照管數(shù)值在什么范圍?

對照管的范圍是0.8-2。對照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;(2)沒有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時間不夠,可以延長反應(yīng)時間(反應(yīng)時間30min可以延長到40min)。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。

若出現(xiàn)測定管大于對照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測,通??梢允箿y定正常。計算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。

50 T GSH試劑盒(肽測試盒)(比色法) Oxidative Stress Detection Kit 常溫保存

500mL Mcilvaine Buffer (Citrate Phosphate Buffer),0.2M,pH4.0  Mcilvaine Buffer (Citrate Phosphate Buffer),0.2M,pH4.0  常溫保存

30次 通用型全基因組擴(kuò)增試劑盒 Universal WGA Kit -20℃保存

2 ug pLVX-aMHC GFP pLVX-aMHC GFP 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

胰胨瓊脂培養(yǎng)基  250g

1瓶 OKT 11細(xì)胞株 OKT 11 低溫運(yùn)輸和保存

胰化大豆瓊脂(TSAM)  250g

1g 溴甲綠 Bromocresol Green Sodium Salt 室溫保存

250m Triton Lysis Buffer   Triton Lysis Buffer   常溫保存

1mL APMSF溶液,10mg/mL APMSF Solution -20℃保存

250mL Sucrose Gelatin Veronal Buffer (SGVB)   Sucrose Gelatin Veronal Buffer (SGVB)   常溫保存

半胱氨酰亞砜裂解酶(CSL)測試盒微量法Phospho-JunB (Thr102/Thr104)  磷酸化活化蛋白激B抗體 規(guī)格: 0.2mlCD171/NCAM-L1  神經(jīng)細(xì)胞粘附分子配體1抗體 規(guī)格: 0.1ml

Mammaglobin A  珠蛋白1抗體 0.2mlphospho-P53(Ser37)  磷酸化瘤抑制基因P53抗體 規(guī)格: 0.1ml

CYP450  細(xì)胞色素P450單氧化抗體 規(guī)格: 0.1mlHERG/KCNH2/ERG  特異性鉀離子通道蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml

phospho-ATR/ACTR(Ser428)  磷酸化ATR抗體 規(guī)格: 0.1mlPhospho-BTK/BPK(Tyr223)  磷酸化蛋白酪激ATK抗體 規(guī)格: 0.1ml

Mouse Anti-Goat IgG/PE-CY5  PE-CY5標(biāo)記的小鼠抗羊IgG 規(guī)格: 0.1mlPhospho-Wee1(Ser123)  磷酸化WEE1蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml

PAFAH2/Lp-PLA2  脂蛋脂A2抗體 規(guī)格: 0.1mlphospho-CRK (Ser41)  磷酸化CRK抗體 規(guī)格: 0.1ml

phospho-IRS1(Ser332/336)  磷酸化胰島素受體底物-1抗體 規(guī)格: 0.1mlphospho-APP/ABPP(Thr743)  磷酸化APP淀粉樣肽前體蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml

Cdc25A  細(xì)胞分裂周期蛋白25抗體 規(guī)格: 0.1mlSTEAP1  前列跨膜上皮1抗原抗體 規(guī)格: 0.2ml

Rabbit Anti-rat IgG/Cy5  Cy5標(biāo)記的兔抗大鼠IgG 規(guī)格: 0.1mlGoat Anti-rabbit IgG/AP  堿性磷酸(AP)標(biāo)記的羊抗兔IgG 規(guī)格: 0.1ml

VWF  管假性友因子/管性友因子抗體 規(guī)格: 0.1mlNogo R  軸索過度生抑制因子受體/Nogo受體抗體 規(guī)格: 0.1ml

ETK/BMX  非受體性蛋白酪激ETK抗體 規(guī)格: 0.1mlP2RX4  三磷酸苷門控陽離子通道蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

phospho-Beta-catenin(Tyr86)   磷酸化β 連環(huán)素蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml 

 


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