特別提醒：本產(chǎn)品僅供科研研究使用，不得用于人體臨床直接檢測。

產(chǎn)品名稱：甲基檸檬酸合酶(MCS）測試盒可見分光光度法

產(chǎn)品規(guī)格：50管/48樣

檢測方法：可見分光光度法

產(chǎn)品貨號(hào)：BK-01S6592

產(chǎn)品分類：三羧酸循環(huán)系列
商品介紹：

所需的儀器和用品：

可見分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿（光徑 1cm）、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水

四、超氧化物歧化酶（SOD）的測定：

建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測定，了解本批樣品情況，熟悉實(shí)驗(yàn)流程，避免實(shí)驗(yàn)

樣本和試劑浪費(fèi)！

1、樣本制備

實(shí)驗(yàn)方法學(xué)：

一、肝素的配制：

市售肝素凍干粉140單位/mg，1克瓶裝，每瓶140，000單位，稱取0.1克肝素凍干粉，加生理鹽水5ml，配成2800單位/ml。取50～100μl濕潤管壁，可抗凝人血3～5ml，血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固，所以最好更濃一些?？梢匀?.1克肝素凍干粉，加3ml生理鹽水溶解后，取50～100μl,可抗凝鼠血2～4ml。

肝素抗凝管的制備：取0.1克肝素凍干粉，加2.5ml生理鹽水。取100μl～150μl滴入塑料或玻璃管中，濕潤管壁，低于80℃小烤箱中（可以用烤面包的小烤箱），橫向轉(zhuǎn)動(dòng)，每隔5～10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次，直至干燥后放入4℃保存，可使2～5ml血液不凝固。

二、血液樣本的收集：

全血根據(jù)收集的條件，分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí)，不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清；抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1～2小時(shí)，直接低速離心分離出血清待用或保存。

2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血，輕輕顛倒充分抗凝后，可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征，選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。

選擇抗凝的注意點(diǎn)：

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后

用于測定。

0.4mL dUTP溶液，100 mM dUTP Solution，100 mM -20℃保存

2 ug pLentiGuide-Puro pLentiGuide-Puro 低溫運(yùn)輸，-20℃保存

改良LETHEEN瓊脂基礎(chǔ) LETHEEN AGAR BASE, MODIFIED 250g

1瓶 MOLM-13細(xì)胞株 MOLM-13 低溫運(yùn)輸和保存

LesEndo瓊脂 m-Endo Agar，LES 250g

1g 阿利新藍(lán) 8GX Alcian Blue8GX 室溫干燥保存

100mL Transformation Buffer-2  Transformation Buffer-2  常溫保存

30µL HRP標(biāo)記內(nèi)參抗體（β-actin）  

2 ug pTAL-Luc pTAL-Luc 低溫運(yùn)輸，-20℃保存

25mg RNOligo(dT)纖維素  常溫

2 ug pEGFP-Tub pEGFP-Tub 低溫運(yùn)輸，-20℃保存

甲基檸檬酸合酶(MCS）測試盒可見分光光度法KChIP2  鉀通道相互作用蛋白2抗體 規(guī)格: 0.2ml

AGFG1  艾滋毒復(fù)制結(jié)合蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

Phospho-FRAP1/mTOR(Ser2448)  磷酸化雷帕霉素靶蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml

PDEF/SPDEF  上皮特異性ETs轉(zhuǎn)錄因子抗體 規(guī)格: 0.1ml

CCDC52  卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白52抗體 規(guī)格: 0.2ml

VCP  含纈酪肽蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml

FEN1  結(jié)構(gòu)特異性核酸FEN1抗體 規(guī)格: 0.2ml

Brn-2  大腦蛋白2抗體 規(guī)格: 0.2ml

SIRT4/SIR 2 like protein 4  沉默調(diào)節(jié)相關(guān)蛋白4抗體 規(guī)格: 0.2ml

AAK1  AP2關(guān)聯(lián)激1抗體 0.2ml

Caspase-1(actived P10)  天冬-胱特異性蛋白家族抗體 規(guī)格: 0.1ml

Mouse Anti-rat IgG/PE-Cy3  PE-Cy3標(biāo)記的小鼠抗大鼠IgG 規(guī)格: 0.1ml 

注意事項(xiàng)：

1、試劑二為酶，不可冷凍，使用時(shí)在冰上放置。

2、對照管只需要做一管。

3、若對照管吸光值大于2，建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用（10μl試劑二原液+60μl蒸餾水）。

4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管，對照管數(shù)值在什么范圍？

對照管的范圍是0.8-2。對照管吸光值過低可能是（1）試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用；（2)沒有按順序加試劑；（3）反應(yīng)時(shí)間不夠，可以延長反應(yīng)時(shí)間（反應(yīng)時(shí)間30min可以延長到40min）。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。

若出現(xiàn)測定管大于對照管，可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大，為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測，通?？梢允箿y定正常。計(jì)算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。