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酸性蛋白酶測(cè)試盒微量法

簡(jiǎn)要描述:酸性蛋白酶測(cè)試盒微量法公司正在出售的產(chǎn)品:沙氏葡萄糖瓊脂顆粒(2015藥典) 英文名稱(chēng): 產(chǎn)品規(guī)格:250g 沙氏葡萄糖液體培養(yǎng)基(2015藥典)(顆粒) 英文名稱(chēng): 產(chǎn)品規(guī)格:250g 青制備培養(yǎng)基 英文名稱(chēng):Penicillinase Preparation Medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g 含青TSA培養(yǎng)基平板 英文名稱(chēng): 產(chǎn)品規(guī)格:7cm/個(gè)*10

  • 產(chǎn)品型號(hào):
  • 廠商性質(zhì):經(jīng)銷(xiāo)商
  • 更新時(shí)間:2023-12-27
  • 訪  問(wèn)  量:1209

詳細(xì)介紹

實(shí)驗(yàn)結(jié)果判斷我有妙招:

1、定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。

2、以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2~3SD,作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。

3、以P/N值(陽(yáng)性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽(yáng)性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。

4、ELISA試劑盒目測(cè)定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照,與陰性對(duì)照的顏色接近者,判定為陰性。

與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類(lèi)及要求:

① 易揮發(fā)、低燃點(diǎn)的試劑要密封,放于陰涼、通風(fēng)、遠(yuǎn)離火源處保存。

② 與水蒸氣,水發(fā)生反應(yīng)的物質(zhì)要密封,并遠(yuǎn)離水源保存。

③ 易與氧氣作用的試劑,應(yīng)將其固體或晶體密封保存,不宜長(zhǎng)期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。

④ 與二氧化碳反應(yīng)的物質(zhì)要密封保存,其相應(yīng)的溶液較固體更易反應(yīng),所以更要注意密封保存。

⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風(fēng)處保存。

本試劑盒僅供研究使用公司實(shí)驗(yàn)室提供免費(fèi)代測(cè),7個(gè)工作日出結(jié)果,提供原始數(shù)據(jù)!

產(chǎn)品名稱(chēng)

規(guī)格

檢測(cè)方法

貨號(hào)

酸性蛋白酶測(cè)試盒微量法

100管/48樣

微量法

BK-01S6623

商品介紹:

測(cè)定意義:

ACP是一種在酸性環(huán)境下催化蛋白質(zhì)水解的酶。該酶主要用于酒精發(fā)酵、啤酒釀造、毛皮軟化、果酒澄清、醬油釀造、飼料等。

測(cè)定原理:

酸性條件下,ACP催化酪蛋白水解產(chǎn)生酪;在堿性條件下,酪還原磷鉬酸化合物生成鎢藍(lán);鎢藍(lán)在680nm有特征吸收峰,通過(guò)測(cè)定其吸光度增加,來(lái)計(jì)算ACP活性。

自備儀器和樣品:

水浴鍋、磁力攪拌器、可調(diào)式移液槍、可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量玻璃比色皿/96孔板、0.5 mL EP管和蒸餾水。

試劑組成和配制:

提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
11.png

操作步驟:

1. 樣品的準(zhǔn)備:

a. 細(xì)胞樣品的準(zhǔn)備:收集細(xì)胞,用4 ℃或冰浴預(yù)冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預(yù)冷組織細(xì)胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類(lèi)常見(jiàn)電動(dòng)勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測(cè)樣品。

b. 組織樣品的準(zhǔn)備:動(dòng)物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細(xì)胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類(lèi)常見(jiàn)電動(dòng)勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測(cè)樣品。

d. 使用BCA蛋白濃度測(cè)定試劑盒(P1511)測(cè)定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細(xì)胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個(gè)活力單位左右(不同細(xì)胞和組織的差異會(huì)比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準(zhǔn)備20-100 ug蛋白量通常已經(jīng)足夠用于后續(xù)檢測(cè)。

e. 根據(jù)蛋白濃度和預(yù)計(jì)的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測(cè)緩沖液適當(dāng)稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準(zhǔn)備好的樣品如果當(dāng)天測(cè)定,可以冰浴保存;如果當(dāng)天不能完成測(cè)定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當(dāng)天完成測(cè)定。

2. 試劑盒的準(zhǔn)備工作:

a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據(jù)待檢測(cè)樣品(包括標(biāo)準(zhǔn)品) 數(shù)量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。

注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當(dāng)混勻后再使用。

b. 反應(yīng)啟動(dòng)工作液配制:將試劑盒提供的反應(yīng)啟動(dòng)液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應(yīng)啟動(dòng)液(40X) 加入39μl SOD 檢測(cè)緩沖液的比例進(jìn)行稀釋?zhuān)礊榉磻?yīng)啟動(dòng)工作液。4℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。

c. (可選做) SOD 標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)備:需自備SOD標(biāo)準(zhǔn)品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標(biāo)準(zhǔn)品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測(cè)中可以各取20微升,參考樣品進(jìn)行檢測(cè)。說(shuō)明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標(biāo)準(zhǔn)品宜現(xiàn)稀釋現(xiàn)使用;本試劑盒對(duì)于SOD的檢測(cè)并不需要SOD作為標(biāo)準(zhǔn)品,但可以使用SOD標(biāo)準(zhǔn)品作為陽(yáng)性對(duì)照或作為對(duì)SOD活性定量的參考。

2 ug pYES2.0 pYES2.0 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

0.5mL 動(dòng)態(tài)濁度法內(nèi)毒素定量試劑盒  

2 ug pET-17b pET-17b 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

LPM瓊脂添加劑 LPM Agar Additive 1ml*5

1瓶 293KB細(xì)胞株 293KB 低溫運(yùn)輸和保存

1000支 1000 μL RNase-free 藍(lán)吸頭(袋裝帶芯)  常溫

48 T 乳酸測(cè)試盒(測(cè)血清、組織等) Oxidative Stress Detection Kit 常溫保存

50T 猩紅熱鏈球菌PCR檢測(cè)試劑盒  低溫運(yùn)輸,-20℃保存

100次 動(dòng)物種屬鑒定PCR Mix 4(28S rDNA D1-D2區(qū)) Animal DNA Barcoding PCR Mix -20℃保存

2 ug pMA09-H pMA09-H 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

硅酸鹽細(xì)菌培養(yǎng)基(不含瓊脂) Silicate bacteria medium(without Agar) 250g

酸性蛋白酶測(cè)試盒微量法phospho-MYF5 (phospho Ser49)  磷酸化生肌決定因子Myf5抗體 規(guī)格: 0.1ml

Connexin-45  間隙連接蛋白45抗體 規(guī)格: 0.1ml

FGF12  成纖維細(xì)胞生因子12抗體 規(guī)格: 0.2ml

phospho-c-Raf(Ser301)  磷酸化原基因c-Raf抗體 規(guī)格: 0.1ml

Tyrosine Hydroxylase(Neuronal Marker)/Tyk2/TYH  酪羥化抗體 規(guī)格: 0.1ml

ANKLE2  ANKLE2蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

phospho-NIPA(Ser354)  磷酸化間變性激核相互作用伴侶蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml

RNF87  環(huán)指蛋白87 規(guī)格: 0.2ml

HFREP1/FGL1  肝細(xì)胞源性纖維蛋白原相關(guān)蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2ml

MAPK4  絲裂原活化蛋白激4抗體 規(guī)格: 0.1ml

NEDD1  神經(jīng)前體細(xì)胞表達(dá)蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2ml

CESK1  分子伴侶CESK1蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

 


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