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血清低密度脂蛋白(LDLC)測試盒微量法

簡要描述:血清低密度脂蛋白(LDLC)測試盒微量法公司正在出售的產品:假單胞分離瓊脂 英文名稱:Pseudomonas Isolation Agar 產品規(guī)格:250g 雙抗巧克力瓊脂 英文名稱:Double anti-chocolate agar 產品規(guī)格:250g 營養(yǎng)瓊脂 英文名稱:Nutrient Agar 產品規(guī)格:250g 酸性L-G培養(yǎng)基基礎 英文名稱:Acid L-G Medium Base

  • 產品型號:
  • 廠商性質:經(jīng)銷商
  • 更新時間:2023-12-26
  • 訪  問  量:719

詳細介紹

本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費代測,7個工作日出結果,提供原始數(shù)據(jù)!

產品名稱

規(guī)格

檢測方法

貨號

血清低密度脂蛋白(LDLC)測試盒微量法

100管/96樣

微量法

BK-01S6667

商品介紹:

測定意義:

低密度脂蛋白為血清蛋白之一,主要由肝臟合成,與冠心病的發(fā)生和動脈粥樣硬化損傷呈正相關,是脂類疾病分類和風險預測的一個重要指標。

測定原理

用沉淀劑分離血清中的低密度脂蛋白,利用酯酶催化酯水解生成游離和游離脂肪酸,從而把酯轉化為FC;進一步利用氧化酶催化FC氧化,生成△4-膽甾烯酮和H2O2;再利用過氧化物酶催化H2O2氧化4-氨基和酚,生成紅色醌類化合物;在500nm有特征吸收峰。

需自備的儀器和用品

離心機,恒溫水浴鍋、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、蒸餾水。

試劑組成和配制:

提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
11.png

實驗結果判斷我有妙招:

1、定量測定結果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。

2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。

3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。

4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。

與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類及要求:

① 易揮發(fā)、低燃點的試劑要密封,放于陰涼、通風、遠離火源處保存。

② 與水蒸氣,水發(fā)生反應的物質要密封,并遠離水源保存。

③ 易與氧氣作用的試劑,應將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。

④ 與二氧化碳反應的物質要密封保存,其相應的溶液較固體更易反應,所以更要注意密封保存。

⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風處保存。

 

操作步驟:

1. 樣品的準備:

a. 細胞樣品的準備:收集細胞,用4 ℃或冰浴預冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預冷組織細胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測樣品。

b. 組織樣品的準備:動物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測樣品。

d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒(P1511)測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細胞和組織的差異會比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準備20-100 ug蛋白量通常已經(jīng)足夠用于后續(xù)檢測。

e. 根據(jù)蛋白濃度和預計的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準備好的樣品如果當天測定,可以冰浴保存;如果當天不能完成測定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當天完成測定。

2. 試劑盒的準備工作:

a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據(jù)待檢測樣品(包括標準品) 數(shù)量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。

注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當混勻后再使用。

b. 反應啟動工作液配制:將試劑盒提供的反應啟動液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進行稀釋,即為反應啟動工作液。4℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。

c. (可選做) SOD 標準品準備:需自備SOD標準品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標準品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升,參考樣品進行檢測。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標準品宜現(xiàn)稀釋現(xiàn)使用;本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標準品,但可以使用SOD標準品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。

鹽緩沖稀釋液(ph7.2)  9ml*20支

1瓶 Ca761細胞株 Ca761 低溫運輸和保存

O157顯色培養(yǎng)基 O157 chromogenic medium 1000(ML)

500U Bst DNA 聚合,全長 Bst DNA Polymerase, Full Length -20℃保存

500mL Phosphate Buffer,0.2M, pH7.4   Phosphate Buffer,0.2M, pH7.4   常溫保存

0.1mL×10 Rosetta (DE3) pLysS 感受態(tài)細胞 Rosetta (DE3) pLysS Competent Cell -80℃保存

2 ug pOJ260 pOJ260 低溫運輸,-20℃保存

R3增殖培養(yǎng)基  250g

1瓶 U87MG細胞株 U87MG 低溫運輸和保存

MUCAP試劑 MUCAP reagent 2ml*4支/盒

1000U 葡萄糖 -6- 脫氫 G6P-DH -20℃保存

血清低密度脂蛋白(LDLC)測試盒微量法NEEP21  NEEP21蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mlPatched/PTCH  Patched/PTCH抗體 規(guī)格: 0.1ml

NEK3  絲/蘇蛋白激Nek3抗體 規(guī)格: 0.2mlSCNN1D/δENaC  上皮鈉離子通道蛋白D抗體 規(guī)格: 0.2ml

phospho-Crkl (Tyr207)  磷酸化接蛋白CrkL抗體 規(guī)格: 0.1ml

SHIP1  SH2結構含磷酸肌醇SHIP1抗體 規(guī)格: 0.2ml

MURF2  肌肉特異性環(huán)指蛋白2抗體 規(guī)格: 0.2ml

CNKSR2  Ras激抑制因子連接增強蛋白2抗體 規(guī)格: 0.2ml

CCDC106  卷曲螺旋結構域蛋白106抗體 規(guī)格: 0.2ml

Goat Anti-human IgM/APC  APC標記的羊抗人IgM 規(guī)格: 0.1ml

MID1/Midline-1/RNF59  環(huán)指蛋白59抗體 規(guī)格: 0.2ml

SHC  SH2結構域轉化蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2ml

MMP-15  基質金屬蛋白-15抗體 規(guī)格: 0.1ml

phospho-LATS1+LATS2 (Thr1079 +Thr1041)  磷酸化瘤抑制基因LATS1/LATS2抗體 規(guī)格: 0.1ml

 


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