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組織無機磷含量測試盒微量法

簡要描述:組織無機磷含量測試盒微量法公司正在出售的產品:兔血漿 進口、國產Rabbit Plasma用于菌凝固試驗0.5ml*20DNA瓊脂 進口、國產DNase Agar用于核糖核酸檢測1007.5%氯化鈉肉湯 進口、國產7.5% Sodium Chloride Broth用于菌的增菌培養(yǎng)(GB標準)250普通肉湯 進口、國產Broth Medium用于菌的增菌培養(yǎng)(SN標準)250

  • 產品型號:
  • 廠商性質:經(jīng)銷商
  • 更新時間:2023-12-25
  • 訪  問  量:1020

詳細介紹

特別提醒:本產品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。

產品名稱:組織無機磷含量測試盒微量法

產品規(guī)格:100管/96樣

檢測方法:微量法

產品貨號:BK-01S6802

產品分類:離子系列
商品介紹:

測定意義:

無機磷主要指磷酸根,參與生物體內多種代謝,包括能量代謝、核酸代謝、蛋白質磷酸化和脫磷酸化等等,此外促進碳水化合物的合成、轉化和轉運。

測定原理:

鉬藍與磷酸根生成660nm有特征吸收峰的物質,通過測定660nm光吸收,即可計算無機磷含量。

自備儀器和用品:

離心機、水浴鍋、可調式移液槍、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、和蒸餾水。

所需的儀器和用品:

可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機、移液器、研缽、冰和蒸餾水

四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:

建議正式實驗前選取 2 個樣本做預測定,了解本批樣品情況,熟悉實驗流程,避免實驗

樣本和試劑浪費!

1、樣本制備

組織樣本:

取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進行

勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。

【注】:若增加樣本量,可按照組織質量(g):提取液體積(mL)15~10 的比例進行提取

 

細菌/細胞樣本:

先收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;取約 500 萬細菌或細胞加入 1mL

提取液,超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復 30 次);

12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。

【注】:若增加樣本量,可按照細菌/細胞數(shù)量(10

4):提取液(mL)為 500~10001 的比例進行提取。 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。

QQ截圖20220307153537.png 

實驗方法學:

一、肝素的配制:

市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉動,每隔5~10分鐘轉動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

二、血液樣本的收集:

全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。

2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。

選擇抗凝的注意點:

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后

用于測定。

2 ug pGL4.18[luc2P/Neo] pGL4.18[luc2P/Neo] 低溫運輸,-20℃保存

抗生素檢定 8 號  250g

1瓶 FaDu細胞株 FaDu 低溫運輸和保存

225ml FB1增菌液均質袋 FB1 Broth 10個/包

2000U 綠豆核酸 Mung Bean Nuclease  -20℃保存

500mL Potassium Phosphate Solution,0.2M, pH8.0   Potassium Phosphate Solution,0.2M, pH8.0   常溫保存

1Mu G鉀鹽溶液,200mg/mL Penicillin G Potassium  室溫保存,溶液需-20℃保存

2 ug pQCXIH pQCXIH 低溫運輸,-20℃保存

麥芽糖  20支

2 ug pCAT3 control pCAT3 control 低溫運輸,-20℃保存

3%NaCl堿性蛋白胨水  9ml*10支

組織無機磷含量測試盒微量法TRIAD3  鋅指蛋白抑制NFκB蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mlPhospho-MYL(Ser19)  磷酸化肌球蛋白輕鏈2抗體 規(guī)格: 0.1ml

RUBISCO  核酮糖1,5二磷酸羧化抗體 規(guī)格: 0.1mlGalactose kinase/GALK1  半糖激1抗體 規(guī)格: 0.2ml

Phospho-HSP27(Ser78)  磷酸化熱休克蛋白27抗體 規(guī)格: 0.1ml

DDAH-II  雙甲基水解2抗體 規(guī)格: 0.2ml

Adiponectin Receptor 1  脂聯(lián)素受體1抗體 0.2ml

Fast skeletal Myosin/MRLC2  骨骼肌肌球蛋白輕鏈2抗體 規(guī)格: 0.1ml

DDX4/MVH  DDX4抗體 規(guī)格: 0.1ml

FSTL5  卵泡抑素相關蛋白5抗體 規(guī)格: 0.2ml

phospho-MAP4(Ser1073)  磷酸化微管相關蛋白4抗體 規(guī)格: 0.1ml

GADD153/CHOP/DDIT3  GADD153抗體 規(guī)格: 0.1ml

Phospho-CDK2 (Thr14)  磷酸化周期素依賴性激2抗體 規(guī)格: 0.1ml

TSPAN15/NET-7  四分子交聯(lián)體15抗體(四旋蛋白) 規(guī)格: 0.2ml 

注意事項:

1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時在冰上放置。

2、對照管只需要做一管。

3、若對照管吸光值大于2,建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用(10μl試劑二原液+60μl蒸餾水)。

4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管,對照管數(shù)值在什么范圍?

對照管的范圍是0.8-2。對照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;(2)沒有按順序加試劑;(3)反應時間不夠,可以延長反應時間(反應時間30min可以延長到40min)。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應倍數(shù)。

若出現(xiàn)測定管大于對照管,可能是樣本中雜質的影響太大,為了降低雜質的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測,通??梢允箿y定正常。計算公式中乘以相應稀釋倍數(shù)。

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